САНИТАРНО-МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЙ КОНТРОЛЬ МОРСКИХ ВОД В МЕСТАХ РЕКРЕАЦИОННОГО ВОДОПОЛЬЗОВАНИЯ РЕСПУБЛИКИ КРЫМ И КРАСНОДАРСКОГО КРАЯ

Иванов С.В.1, Исмаилова М.Э.2, Кондакова Ю.М.2, Рамазанова Э.Т.2

1Старший преподаватель кафедры гигиены общей с экологией; 2студентки

Крымский федеральный университет им. В.И.Вернадского, Медицинская академия им. С.И.Георгиевского (структурное подразделение), г.Симферополь

САНИТАРНО-МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЙ КОНТРОЛЬ МОРСКИХ ВОД В МЕСТАХ РЕКРЕАЦИОННОГО ВОДОПОЛЬЗОВАНИЯ РЕСПУБЛИКИ КРЫМ И КРАСНОДАРСКОГО КРАЯ

 

Аннотация

В статье раскрывается понятие санитарно-микробиологического контроля и оценивается его значение в мониторинге чистоты прибрежных морских вод рекреационного назначения на примере микробиологических исследований, произведенных на побережье Черного моря в Республике Крым и Краснодарском крае. Описываются основные показатели, используемые для санитарно-микробиологической оценки морских вод, и современные методики определения этих показателей. Оценивается санитарно-эпидемиологическая обстановка рекреационных морских вод Республики Крым и Краснодарского края.

Ключевые слова: гигиена, экология, эпидемиология, рекреационные ресурсы, санитарно-микробиологический контроль, микробиологический мониторинг.

 

Ivanov S.V.1 , Ismailova M.E.2, Kondakova Yu.M.2, Ramazanova E.T.2

1Senior Lecturer at the Department of the general hygiene with the ecology; 2students

Crimean federal university named after V.I.Vernadsky, Medical academy named after S.I.Georgievsky (structural subdivision), Simferopol

SEA WATER SANITARY-MICROBIOLOGICAL CONTROL IN PLACES OF RECREATIONAL WATER USE IN THE REPUBLIC OF CRIMEA AND KRASNODAR KRAI

Summary

The concept of the sanitary-microbiological control is opened up and its importance in monitoring of recreational sea water cleanness is estimated in the article by example of microbiological research which were done on the Black Sea coast in the Republic of Crimea and Krasnodarsky krai. Basic characteristics, which are used for sea water sanitary-microbiological evaluation, and modern determination methods of these characteristics are described. Sanitary-epidemiological status of recreational sea water in the Republic of Crimea and Krasnodarsky krai is estimated.

Key words: hygiene, ecology, epidemiology, recreational resources, sanitary-microbiological control, microbiological monitoring.

 

Введение. Человек издревле использовал морские водоемы с целью рекреации — восстановления израсходованных во время труда или в период болезни физических и душевных сил человеческого организма, повышения его работоспособности и уровня здоровья в целом. Действительно, использование в рекреационных целях морских прибрежных вод во многом способствует укреплению здоровья.

В 1970-х гг. на это обратила внимание Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ). Были созданы Руководящие принципы по безопасной рекреационной водной среде, которые устанавливают международные нормы рекреационного использования воды. Стоит заметить, что к данным принципам постоянно выходят дополнения, бюллетени. Так, в июне 2018 г. вышли рекомендации, дополняющие так называемую the Bathing Water Directive 2006/7/ЕС (дословно с англ. — Директива о воде для купания).

Однако следует помнить, что морские воды, как и остальные компоненты окружающей среды, подвержены загрязнению. Особенно это касается прибрежных морских вод.

И прежде всего, любой водоем, в т.ч. морской, — это естественная среда для многих микроорганизмов. Это позволяет человеку осуществлять санитарно-микробиологический контроль прибрежных морских вод, который заключается в изучении и установлении их микрофлоры.

Исследование. Микробиологический контроль подразумевает использование санитарно-показательных микроорганизмов, которые служат индикаторами, позволяющими оценить степень безопасности исследуемой среды.

Собственно санитарно-показательные микроорганизмы — это, как правило, представители нормальной человеческой и животной микрофлоры. Поэтому их присутствие указывает на загрязнение прибрежных морских вод выделениями человека или животных. Последний факт может опосредованно свидетельствовать о наличии в воде патогенных микроорганизмов, которые по обыкновению так же выделяются в окружающую среду вместе с выделениями животных и человека.

Все санитарно-показательные микроорганизмы принято разделять на три основных группы, обозначаемые римскими цифрами (I, II, III)  или первыми буквами английского алфавита (A, B, C).

I (A) группа — представители нормальной микрофлоры кишечника человека и животных. К ним относятся бактерии группы кишечной палочки (БГКП), энтерококки, бактерии рода Proteus (в частности Proteus mirabilis) и сульфитредуцирующие клостридии. Наличие таких микроорганизмов в среде свидетельствует о свежем фекальном загрязнении.

II (B) группа — представители нормальной микрофлоры верхних дыхательных путей человека и других гомойотермных организмов. Представлены стафилококками, зеленящими α-стрептококками и гемолитическими β-стрептококками. Их присутствие говорит о воздушно-капельном загрязнении среды (такой тип загрязнения может указывать на возможное наличие  возбудителей инфекционных заболеваний, передающихся в том числе и воздушно-капельным путем).

III (C) группа — сапрофиты. Эта группа выделяется особо, поскольку её представители обитают вне человеческого или животного организма (термофильные, нитрифицирующие бактерии, Proteus vulglaris). Данные микроорганизмы служат индикаторами степени естественного самоочищения исследуемого объекта. [1, 18-20]

В случае микробиологического исследования прибрежных вод наибольший интерес представляет I и III группы санитарно-показательных микроорганизмов.

Согласно СанПиН 2.1.5.2582-10 «Санитарно-эпидемиологические требования к охране прибрежных вод морей от загрязнения в местах водопользования населения», в морских водах рекреационного назначения в обязательном порядке регистрируется число общих колиформных бактерий (ОКБ), число E.coli, колифагов, энтерококков и стафилококков.

Дополнительными показателями при исследовании морской воды являются число бактерий родов Shigella, Salmonella, Legionella и проч., а также число вирусов. Эти показатели исследуются, если превышены допустимые значения загрязнения по обязательным показателям.

Помимо этого, в начале купального сезона (т. е. непосредственно перед максимальной антропогенной нагрузкой на прибрежные морские воды) устанавливается число жизнеспособных яиц гельминтов, цист патогенных кишечных простейших микроорганизмов. [2, 99]

Так, в результате санитарно-гигиенического мониторинга в 2018-м году на территории Республики Крым был закрыт 31 пляж по причине несоответствия требованиям безопасности по микробиологическим показателям. В Краснодарском крае в период с 06.07.18 по 22.07.18 были закрыты 5 пляжей вследствие аварии на канализационно-насосной станции в г.Геленджик, произошедшей 6-го июля 2018-го года. После того, как последствия аварии были ликвидированы, и микробиологические показатели нормализовались, пляжи снова были открыты для купания. [3; 4]

Обязательные показатели. Общие колиформные бактерии (ОКБ) — палочки из числа БГКП, относящиеся к так называемым лактозоположительным палочкам (ЛКП). Включают в себя E.coli и термотолерантные кишечные палочки. По Граму окрашиваются отрицательно, не образуют спор. Хорошо растут на дифференциальных лактозосодержащих средах 24-48 ч при температуре 37°С, поскольку расщепляют лактозу с образованием кислоты и газа. Оксидазоотрицательны, поэтому после выявления характерных колоний на среде Эндо выполняют оксидазный тест. [1, 22; 5, 23-27; 6, 109-111]

Число ОКБ в зоне купания не должно превышать 500 КОЕ/100мл. [2, 99]

E.coli — типичный представитель рода Escherichia семейства Enterobacteriacae. Факультативный анаэроб. Палочка, окрашивающаяся по Граму отрицательно. Отличительной особенностью является образование индола. [6, 190-191]

Идентифицируют E.coli классическим мембранным методом (с использованием мембранных фильтров) или с использованием лактозного бульона с борной кислотой. Кроме того, на данный момент применяются и ускоренные методы на хроомокульт колиформ агаре и на триптоновом агаре с желчью и X-глюкуронидом. При помощи этих сред можно произвести учет результатов уже через 24 часа.

Число бактерий данного вида является важным санитарно-микробиологическим показателем, поскольку E.coli относится к группе условно-патогенных микроорганизмов. При попадании в чужеродные органы и ткани (другого организма) E.coli может вызывать парентеральные  и септические эшерихиозы. [5, 27-28]

Число E.coli в зоне купания – не более 10 КОЕ/100мл. [2, 99]

Колифаги — это бактериофаги (вирусы), разрушающие E.coli и формирующие зоны лизиса на поверхности питательной среды, засеянной кишечной палочкой по методу газона. Зоны лизиса также именуются «бляшками», в связи с чем при постановке результатов колифаги исчисляются в БОЕ (бляшкообразующих единицах), а не в КОЕ (колониеобразующих единицах). Колифаги обнаруживаются при использовании тест-культур E.coli. [5, 30-33; 6, 111]

Величина данного обязательного показателя в рекреационных морских водах в норме не превышает 10 БОЕ/100 мл. Увеличение норматива до 10 БОЕ/100 мл и более свидетельствует об эпидемиологической опасности водоема, связанной с загрязнением исследуемых вод вирусами. [2, 99; 5, 30]

Энтерококки — семейство грамположительных бактерий округлой или овальной формы, по морфологическим и функциональным характеристикам близкое к стрептококкам. Среди этой группы санитарно-показательными микроорганизмами считаются виды Enterococcus faecalis, Enterococcus faecium и Enterococcus durans, первые два из которых являются составляющими микрофлоры кишечника у человека. Enterococcus faecalis, в свою очередь, разделяется на два биовара — zymogenes и liquefaciens. Наибольшое индикаторное значение имеет E.liquefaciens. [1, 23; 5, 28]

Энтерококки идентифицируются при помощи мембранного или титрационного метода (с использованием щелочно-полимиксиновой среды и МИС — молочно-ингибиторной среды Калины, азидной среды Сланеца-Бертли или желчной среды Турчинского). [5, 28-29]

Количество энтерококков в местах рекреационного водопользования — не более 10 КОЕ/100 мл. Превышение нормы подтверждает наличие свежего фекального загрязнения. [2, 99; 5, 28]

Стафилококки — грамположительные кокки, не образующие спор. Факультативные анаэробы. Обладают ферментом каталазой и плазмокоагулазой, но при этом оксидазоотрицательны. Характерной чертой является группировка клеток в мазке чистой культуры в виде гроздей винограда. [6, 149]

Стафилококки определяются методом мембранной фильтрации. Наибольшее индикаторное значение пренадлежит стафилококкам, имеющим лецитиназу (фермент, разрушающий клеточные мембраны). К последним относится S.aureus — чаще всего именно этот вид используется в качестве индикатора, поскольку он является основной причиной гнойных заболеваний кожи, глаз и верхних дыхательных путей. При подозрении на S.aureus сомнительные колонии повторно пересеваются на ЖСА (желточно-солевой агар), после чего берется мазок и проводится тест на плазмокоагулазу. [5, 29-30]

Норма стафилококков для зоны купания — 0 КОЕ/100 мл. В случае присутствия стафилококков в морских водах рекреационного назначения говорят о загрязнении вод микрофлорой кожных покровов и верхних дыхательных путей человека. [2,99; 5, 29]

Холерный вибрион (Vibrio cholerae) —  грамотрицательная бактерия, имеющая характерную форму запятой. Факультативный анаэроб. Подвижный, спор и капсул не образует. [6, 236-237]

Холерный вибрион определяют при помощи TCBS-агара (T – тиосульфат натрия, C – цитрат, B – бромтимоловый синий, S – сахароза). Возбудителями холеры являются серовары V. cholerae O1 и V. cholerae O139. Все непатогенные холерные вибрионы обозначаются как V. cholerae non O1/O139. [6, 237-242]

  В чистой морской воде холерный вибрион отсутствует. При этом считают даже непатогенные серовары, поскольку их наличие в прибрежных водах может говорить о возможном формировании определенных экологических условий, благоприятных для роста, развития и размножения возбудителей холеры. [7]

Данные о проведении микробиологических исследований морских вод рекреационного назначения в Республике Крым и Краснодарском крае. ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии Республики Крым и городе федерального значения Севастополе» регулярно проводит санитарно-гигиенические исследования морской воды и лабораторный контроль её качества согласно СанПиН 2.1.5.2582-10 «Санитарно-эпидемиологические требования к охране прибрежных вод морей от загрязнения в местах водопользования населения».

По данным территориального отдела Сакского района Межрегионального управления Роспотребнадзора по Республике Крым и г.Севастополю, в июне-июле 2018-го года на черноморском побережье, территориально относящемся к г.Саки, для микробиологического исследования морских вод было взято: 74 пробы на микробиологические показатели, 30 проб на паразитологические показатели, 8 проб на вирусологические показатели, 11 проб на холерного вибриона. Все результаты лабораторных исследований отобранных проб не противоречат СанПиН 2.1.5.2582-10 «Санитарно-эпидемиологические требования к охране прибрежных вод морей от загрязнения в местах водопользования населения». Полученные данные соответствуют нормальным показателям.

В период май-сентябрь 2018-го года в Крыму производился забор морской воды на наличие холерных вибрионов. Забор воды проводился на берегу, принадлежащему территории базы отдыха «Прибой» в г.Саки. В первую серию забора 02.05 — 09.07.2018 было отобрано 11 проб морской воды. Результаты лабораторного исследования всех 11-ти проб на холерный вибрион отрицательные.

Кроме того, ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Республике Крым и г.Севастополе» периодически осуществляет забор морской воды на предмет вирусов (в частности, ротавирусы, норовирусы, астровирусы). Забор воды на присутствие вирусов так же проводится на территории базы отдыха «Прибой». Согласно протоколам от 08.06.18 и от 10.07.18, результаты проб позволяют судить об отсутствии вирусов в рекреационных водах. [3]

Согласно отчетам Роспотребнадзора, в Краснодарском крае в период июнь-июль отобрано 242 пробы воды Черного моря в пределах города-курорта Анапа, в том числе на микробиологические показатели – 88, на паразитологические – 40, на вирусологические – 10, на наличие холерного вибриона – 11. Обязательные и дополнительные санитарно-микробиологические показатели соответствовали нормальным. Патогенных и условно-патогенных микроорганизмов (в том числе холерного вибриона), вирусов и яиц гельминтов в ходе исследования не обнаружено. [8]

Заключение. Санитарно-микробиологический контроль морской воды — наиболее информативный способ установления факта органического загрязнения и включает в себя определение наличия в воде патогенных и условно-патогенных микроорганизмов, вирусов, яиц гельминтов, цист и т.п. Поэтому необходимо регулярно проводить такой контроль прибрежных вод в зоне купания.

По состоянию на 2018-й год в Республике Крым и Краснодарском крае с определенной периодичностью производится забор морской воды на лабораторные исследования, причем результаты этих исследований свидетельствуют об отсутствии эпидемиологической опасности прибрежных вод Черного и Азовского морей. Это позволяет считать санитарно-гигиеническое состояние морских вод рекреационного назначения Республики Крым и Краснодарского края контролируемым, а информированность отдыхающих о правилах поведения в зоне купания для поддержания чистоты морской воды удовлетворительной.

 

Литература

  1. Кондакова Г.В. Санитарная микробиология: Текст лекций: Яросл. гос. ун-т. — Ярославль: ЯрГУ, 2005. 84 с.
  2. Петров В.А., Черток А.Г. Гигиеническая оценка качества и безопасности водного фактора среды обитания человека. Методическая разработка практического занятия: Владивостокский гос. мед. ун-т — Владивосток, 2012. 107 с.
  3. Роспотребнадзор по Республике Крым и городу федерального значения Севастополю О мониторинге качества морской воды на пляжах города Севастополя на 31.08.2017. [Электронный ресурс]. — Режим доступа: https://clck.ru/FuMoT
  4. Роспотребнадзор по Краснодарскому краю О ситуации в городах-курортах Геленджике и Анапе [Электронный ресурс]. — Режим доступа: https://clck.ru/FuMpF (02.08.2018)
  5. «МУК 4.2.2959-11. 4.2. Биологические и микробиологические факторы. Методы санитарно-микробиологического и санитарно-паразитологического анализа прибрежных вод морей в местах водопользования населения. Методические указания» (утв. Роспотребнадзором 29.07.2011) — 69 c.
  6. Генералов И.И., Новиков Д.К., Данющенкова Н.М. Медицинская микробиология: ВГМУ — Витебск, 2010. 597 c.
  7. Роспотребнадзор по Ямало-Ненецкому округу Памятка по профилактике холеры для туристов [Электронный ресурс]. — Режим доступа: https://clck.ru/FuMpQ
  8. Роспотребнадзор по Краснодарскому краю О санитарно-эпидемиологической ситуации на Черноморском побережье Краснодарского края [Электронный ресурс]. — Режим доступа: https://clck.ru/FuMpk